KTV Cao đẳng Xét nghiệm hướng dẫn thực hiện thử nghiệm PYR

Quy trình thực hiện thử nghiệm PYR của vi khuẩn được áp dụng ở bộ phận vi sinh của các trung tâm xét nghiệm, gúp bác sĩ chẩn đoán bệnh lý chính xác.Vậy kỹ thuật thử nghiệm PYR thực hiện ra sao?

• Covid-19 ngày 8/8: Bộ Y tế công bố thêm 5 ca mắc mới
• Hướng dẫn cách ly tại nhà phòng phòng chống Covid-19 đúng cách
• Ngộ độc rượu có biểu hiện như thế nào?

Hình ảnh thạch sử dụng trong thử nghiệm

Nguyên tắc thử nghiệm PYR của vi khuẩn

 PYR là chất để phát hiện enzym pyrrolidonyl peptidase. Enzym peptidase thủy phân hidro của chất nền tạo ra β-napthylnamid, khi thêm cinnamaldehyd 0,01% vào, nếu xảy ra phản ứng thì sẽ tạo thành hợp chất có màu.

Trang thiết bị, vật tư cần có khi tiến hành thử nghiệm PYR

Các giảng viên Văn bằng 2Cao đẳng Xét nghiệm Tp.HCM tại Trường Cao đẳng Y dược Pasteur chia sẻ, để quy trình thử nghiệm tiến ra thành công, KTV cần chuẩn bị đầy đủ các trang thiết bị, mẫu vật, hóa chất,… như sau:

1. Trang thiết bị
   • Tủ an toàn sinh học cấp 2
   • Kính hiển vi quang học.
   • Máy ly tâm
   • Máy trộn, lắc
   • Ống vô trùng có nắp đậy.
   • Đèn cồn, que cấy nhọn, lam kính.
   • Pipet Pasteur vô trùng.
2. Sinh phẩm hóa chất
   • Khoang giấy PYR để ở 2-8 độ C /chỗ tối.
   • Cinnamaldehyd 0,01%
   • Nước muối sinh lý vô trùng 0,9%.
   • Chủng vi khuẩn nghi ngờ
   • Các hóa chất được kiểm tra theo Quy trình kiểm tra chất lượng sinh phẩm, hóa chất, lưu lại kết quả sau khi kiểm tra.
   • Chứng:

+ Chứng Dương: Enterococcus faecalis ATCC 29212

+ Chứng Âm: Escherichia coli ATCC 25923

An toàn cần có trong quá trình thực hiện thử nghiệm PYR của vi khuẩn

• Thực hiện thao tác với mẫu bệnh phẩm trong tủ ATSH.
• Sử dụng các thiết bị bảo hộ cá nhân.

PYR là thử nghiệm gì?

Nội dung thực hiện thử nghiệm PYR của vi khuẩn

• Sử dụng panh gắp một khoanh PYR đặt vào đĩa petri.
• Làm ẩm khoanh giấy bằng nước vô trùng, nhưng không làm ướt.
• Sử dụng que cấy vô trùng lấy khuẩn lạc (khóm) đã nuôi cấy 24-48 giờ từ môi trường thạch máu.
• Phết khuẩn lạc (khóm) lên khoanh giấy.
• Phản ứng tạo màu đỏ xảy ra 2 – 10 phút.
• Nhỏ một giọt cinnamaldehyd 0,01% vào, quan sát sự thay đổi màu.

Diễn giải kết quả và báo cáo

Giảng viên Cao đẳng Y dược TPHCM chuyên ngành Cao đẳng Xét nghiệm – Trường Cao đẳng Y dược Pasteur HCM cho biết: Sau khi đã hoàn thành quá trình thử nghiệm PYR, kĩ thuật viên Xét nghiệm cần ghi lại kết quả chính xác và cần được xác nhận bởi bác sĩ chuyên khoa tại Khoa!

• Dương tính: phản ứng tạo màu hồng tươi, đỏ đậm trong vòng 1 phút.
• Âm tính: không đổi màu, màu xanh hoặc màu hồng nhạt.

Lưu ý (cảnh báo) khi thực hiện thử nghiệm PYR

• Thử nghiệm âm tính giả nếu khoanh PYR quá ẩm, hoặc lấy khuẩn lạc (khóm) trên các môi trường chọn lọc hoặc trong các ống thạch thử nghiệm tính chất sinh vật hóa học.
• Nếu kết quả yếu, nhạt màu trên khoanh giấy thử nghiệm với Staphylococcus aureus. Muốn khẳng định là dương tính cần làm các thử nghiệm khác hoặc làm trong ống PYR có trong một số kit định danh nhanh như API RAPID STREP.

Tài liệu tham khảo:  Thực hành kỹ thuật xét nghiệm trên lâm sàng (NXB Y học Hà Nội)

Trường Cao đẳng Y dược Pasteur TPHCM tổng hợp chia sẻ